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什么事表面抗金標(biāo)法--HBsAg?
更新時間:2010-09-13   點擊次數(shù):2740次

乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和表面抗體(抗—HBs)HBsAg存在于病毒顆粒的外殼以及小球形顆粒和管狀顆粒。于感染后2-12周,丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)升高前,即可由血內(nèi)測到,一般持續(xù)4~12周,至恢復(fù)期消失,但感染持續(xù)者可長期存在。HBsAg無感染性而有抗原性,能刺激機體產(chǎn)生抗- HBs。在HBsAg自血中消失后不久或數(shù)星期或數(shù)月,可自血中測到抗—HBs,抗HBs出現(xiàn)后其滴度逐漸上升,并可持續(xù)存在多年。抗-HBs對同型感染具有保護作用。近期感染者所產(chǎn)生的抗-HBs屬IgM,而長期存在血中的為抗-HBsIgG。HBsAg有“a”、“b”、“y”、“r”、“w”等多種抗原決定簇,其中“a”是共同的抗原決定簇,“d”、“y”和“r”、“w”為主要的亞型決定簇。

  HBsAg有8種亞型和2種混合亞型,以adr,adw,ayr,及ayw為主的4種亞型。各亞型的地理分布不同,adr亞型主要分布在亞洲及太平洋地區(qū),adw亞型主要見于北歐,美洲及澳洲,ayw亞型主要在非洲,中東和印度,ayr亞型罕見。在我國的主要是adr亞型,但廣西的東北部則主要為adw亞型,西藏,新疆及內(nèi)蒙則有ayw亞型為主。亞型的測定對流行病學(xué)調(diào)查,預(yù)防研究有一定意義。

金標(biāo)紙條采用雙抗原夾心法免疫測定原理,選擇經(jīng)純化的基因工程制備的gp36、gp41、p24抗原作為包被抗原和gp41、gp36基因工程抗原和 p24合成肽作為膠體金結(jié)合抗原。當(dāng)待檢標(biāo)本中含有HIV抗體時,先和金標(biāo)記抗原結(jié)合,由于層析作用反應(yīng)復(fù)合物沿硝酸纖維膜向前移動,當(dāng)遇到包被抗原時,形成Ag-Ab-Ag-Au復(fù)合物而富集在包被線上,形成紅色沉淀線。同時在包被膜上還有一條質(zhì)控線對照,故當(dāng)有兩條紅線時判為陽性,只有一條紅線時,判為陰性。
   elisa也是采用雙抗原夾心法免疫測定原理,抗原包被于固相表面上,血清中如存在抗體則特異與之結(jié)合,再經(jīng)過酶(抗抗體)、顯色劑等級連放大作用(每步之間要洗的!)根據(jù)co值判斷結(jié)果。
   從試驗原理基本是一致的,具體方式金標(biāo)識以層析推進反應(yīng)的進程,elisa是直接加入反應(yīng)再清洗。如果每個步驟均得到嚴(yán)格控制的話,elisa更可靠一點,如果有凝血或洗板不干凈,恐怕還不如金標(biāo)。
   一般elisa,如陽金標(biāo)在作一下。金標(biāo)亦陽,elisa第二遍就省了,直接送確診試驗室。如金標(biāo)陰,或是elisa弱陽(od<2*co)elisa再復(fù)查。


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